维生素B12测定用培养基M036由国际**Himedia Laboratories生产,具有国际认证的GMP,CE和FDA,ISO9001:2008,ISO13485:2003等证书,成分完全符合
《GB 5413.14-2010食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中维生素B12的测定》,美国药典和美国公职分析化学师协会(AOAC)推荐用培养基。
维生素B12测定用培养基原理
乳酸杆菌生长需要特别的营养,因而在非选择性培养基上很难生长。维生素测定用培养基用于维生素的微生物法测定。该方法需要三种培养基:即维持培养基,上海威正翔禹生物科技有限公司,威正翔禹生物科技,用于保持菌种活力;接种培养基,用于测试菌液的制备;测定用培养基,用于待测维生素的定量。
维生素B12测定用培养基,不含维生素B12,但包含所有其他维生素和必要养分,用于莱士曼乳酸杆菌(ATCC 7830)的生长。莱士曼乳酸杆菌(ATCC 7830)作为测定用爿菌,最早由Capp等人描述(1)并被美国药典和美国分析化学家协会(AOAC)所推荐(凵2,3)。
用已知稀释度的维生素B12标准品,可以制备标准曲线(2,3)。
测试菌液的制备是将将活化后的菌株接种到乳酸杆菌肉汤培养基中,推荐在37°C 孵育24 小时,再离心、清洗、重悬于10 ml 生理盐水中,再通过浊度分析或酸度分析,确定生长反应。
用维生素B12的浓度及对应的吸光度制作标准曲线。用标准曲线可确定待测样本中的维生素B12的浓度。
应非常小心地避免培养基和玻璃器具的污染。应使用洁净的无去污剂的玻璃器具。少量的外源物质的污染可能导致错误的结果。
用于接种的测定菌应在专用的培养基中培养。
维生素B12测定用培养基应用
维生素B12测定用培养基推荐采用莱士曼氏乳酸杆菌(ATCC 7830)作为测定用菌,进行维生素B12的微生物法测定。
质量控制
Ø外观——奶油色至黄色,具均匀性,倾向形成可容易分解成粉末状的软块
Ø制备好的培养基颜色和透明度——淡琥珀色透明溶液,原装进口维生素B12测定用培养基哪里有,可能有轻微沉淀
Ø配比浓度——在25°C下8.5%w/v(8.5g/100ml水)水溶液,pH值为6.1±0.2
ØpH值——5.90-6.30
配置
称取8.45g干粉培养基溶于100ml蒸馏水,必要时加热使培养基完全溶解。混匀,使轻微的沉淀均匀分布。测定时,分装试管,每管为5ml培养基(包含标准品和待测样品)。加蒸馏水,使总体积达到10ml。高压**15磅121°C 5分钟。立即冷却培养基。每个试管(10 ml)的维生素B12水平为0、0.025、0.05、0.075、0.1、0.125、0.15、0.2 ng时,原装进口维生素B12测定用培养基哪里有,均可获得满意结果。
培养反应
进行微生物法测定维生素B12。采用莱士曼氏乳酸杆菌(ATCC 7830),35-37°C孵育18-24小时。
生长状况
随着测定管标准品水平升高,(美国药典维生素B12标准水平,0,0.025,0.050,0.075,0.1,0.125,0.150,0.2ng),目标菌生长逐渐递增,伴随着620nm处吸光度的增加。
文献
1. Capps B. E., Hobbs M. H. H. and Fox S. H., 1949, J. Biol. Chem., 178:517.
2. The United States Pharmacopoeia, 2006, USP29/NF24, The United States Pharmacopeial Convention, Rockville, MD.
3. H. Williams, (Ed.), 2005, Official Methods of Analysis of the Association of Official Analyti
.威正翔禹生物科技|||原装进口维生素B12测定用培养基哪里有 |