赛默飞三重四级杆液质联用仪的操作涉及多个步骤,以下是一个概括性的操作流程,供您参考:
一、开机前准备
1.查阅文献:了解目标分析物质的液质条件。
2.阅读操作说明:熟悉UPLC(超**液相色谱)及质谱仪的操作方法及注意事项。
3.检查线路和流动相:确保所有线路连接完好,流动相充足。有机流动相应为HPLC级,水相可使用纯水或符合要求的纯净水,并每天更换以保持新鲜。
4.准备样品:标样和样品需用0.2μm的针头式滤器过滤,并放置在样品托盘上,记录位置。**个和**一个样品应为空白,用于清洗进样系统及管路。
二、开机
1.打开氮气发生器:等待5分钟,确认压力正常。
2.打开机械泵电源:等待15分钟。
3.打开质谱电源:包括质谱主电源开关、真空开关等。用密封垫或放电针堵上离子传输毛细管。
4.打开液相各模块电源:如泵、自动进样器、柱温箱等。
5.打开计算机工作站:进入相应的分析软件(如Xcalibur)。
三、建立分析方法
1.化合物ESI/MS/MS质谱条件优化:
(1)打开Quantum Tune Master界面。
(2)选择Compound Optimization Workspace,设置优化参数,包括Spray Voltage、Sheath gas pressure、Aux gas pressure等。
(3)进行MS Only和MS+MS/MS优化,保存质谱方法。
2.化合物LC/MS/MS方法建立:
(1)在Xcalibur中,点击Instrument Setup,设置液相色谱和质谱的参数。
(2)输入流动相名称、比例、流速等,设置自动进样器参数,如Wash Volume、Flush Volume等。
(3)单击Paste scan event按钮,保存LC/MS/MS方法。
四、样品序列建立及样品分析
1.建立样品序列:
(1)在分析软件中(如Analyst®),双击Build Acquisition Batch,添加样品信息,如Sample Name、Rack Code、Plate Position、Vial Position等。
(2)选择分析样品所用的采集方法,保存批处理序列。
2.提交样品分析:
(1)点击Acquire按钮,选择批处理序列进行提交。
(2)设置平衡时间,点击Start Sample图标开始进样分析。
五、定量数据处理及结果浏览
1.数据处理:
(1)分析完成后,使用相应的定量软件(如MultiQuant、ChemView等)进行数据处理。
(2)建立定量数据处理方法,进行数据处理及定量结果浏览。
六、结束分析
1.清洗和保护:
分析完成后,运行洗柱和保护柱的程序,将流速设置为0。
2.关机:
(1)将质谱设置为待机Standby状态,关闭电子开关、真空开关。
(2)两分钟后关闭质谱主电源开关,关闭液相部分开关、计算机及UPS开关。
注意事项
1.日常维护:定期检查仪器的线路、流动相、过滤器等,保持仪器清洁。
2.环境要求:确保仪器周围无强烈震荡源及电磁感应装置,电源接地,室温及湿度控制在适宜范围内。
3.安全操作:在操作过程中注意个人安全,避免直接接触高温部件或有害化学品。
请注意,以上操作流程仅供参考,具体操作可能因仪器型号、软件版本及实验室要求而有所不同。在实际操作前,请务必仔细阅读仪器操作手册,并遵循实验室的安全规范。
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